Tinción
Se
llama tinción al procedimiento mediante el cual se tiñen las preparaciones
histológicas, fundándose en la afinidad que para determinados agentes
colorantes poseen los diversos componentes de la célula y substancias
intercelulares, siendo indispensable que nos se destiñen con un lavado ulterior
efectuado con el disolvente empleado para preparar la solución.
El
término de agente colorante es utilizado
en un amplio sentido, e incluye a todas las substancias que son capaces de
combinarse con los tejidos y mejorar la visibilidad de sus componentes al
impartirles color, siendo necesario que no tiñan difusamente por igual a los
componentes de un preparado, sino que se fije selectivamente en determinados
elementos en forma constante y regular.
Los colorantes básicos reaccionan con los grupos aniónicos de los componentes texturales, que son los grupos
fosfato de los ácidos
nucleicos (ADN y RNA), los grupos sulfato
de los glucosaminoglucanos y los grupos
carboxilo de las proteínas. la reacción de estos grupos varía según el ph.
La hematoxilina no es un colorante
básico en sentido estricto. se la utiliza con un mordiente (intermediario), entre el componente textural y la
anilina, y es debido a este que la coloración con hematoxilina se asemeja a la
tinción que produce un colorante básico. la unión en el complejo tejido –
mordiente – hematoxilina, no consiste en un simple enlace, y cuando la
hematoxilina se coloca en agua no se disocia del tejido, sino que permanece
firmemente adherida. a causa de esto, la hematoxilina se presta para aquellos
procedimientos tintoriales en los que a ella le sigue la eosina u otros
colorantes ácidos.
Los colorantes básicos verdaderos no
suelen usarse en secuencia en donde el colorante básico es seguido por uno
ácido, por que la anilina básica tiende a disociarse del tejido durante los
lavados posteriores en soluciones
acuosas.
Un colorante ácido lleva una carga negativa en la porción coloreada
de la molécula y su fórmula general se representa:
na+
anilina-
Los colorantes ácidos se unen
primariamente a los componentes texturales por medio de enlaces electrostáticos
de manera similar pero opuesta a la de los colorantes básicos. las anilinas
ácidas reaccionan con grupos catiónicos, como los grupos amino ionizados de las proteínas.
Cualquier componente de los tejidos
que reaccione con un colorante básico (o
con hematoxilina) se dice que es basófilo y que presenta basofilia.
estos componentes son:
X
la
heterocromatina y los nucleolos del núcleo por los grupos fosfato ionizados.
X
ergatoplasma
(parte del citoplasma) por grupos
fosfato ionizados.
X
matriz
del cartílago por grupos sulfato
ionizados.
Los componentes texturales que se
tiñen de colorantes ácidos se dice que son acidófilos y que presentan acidofilia.
Son acidofilos:
X la mayor parte del citoplasma
no especializado.
X filamentos citoplasmáticos.
X fibras extracelulares.
Todos estos debidos a grupos amino ionizados.
Los
colorantes más utilizados son la HEMATOXILINA Y
la EOSINA.
La EOSINA es un colorante ácido y sus propiedades tintoriales
pueden ser explicadas sobre la base de lo que se sabe acerca de la acción de
las anilinas ácidas. La HEMATOXILINA aunque no es un colorante básico, posee propiedades muy semejantes a las
anilinas básicas.
COLORANTES:
X Básicos: HEMATOXILINA (Núcleo
Azul)
X Ácidos: EOSINA (Citoplasma
Rosa)
